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Morfologia e Citologia Bacteriana Gabriela Henriques Marques 06 de Março de 2012 Universidade Federal de Pelotas Instituto de Biologia Departamento de Microbiologia e Parasitologia Disciplina de Microbiologia e Imunologia 1 2 A Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz) é uma instituição de nível federal vinculada ao Ministério da Saúde localizada na cidade do Rio de Janeiro, Brasil. Criada em 1900, pelo renomado sanitarista Oswaldo Cruz. É a instituição mais importante em ciência e tecnologia na área de saúde da América Latina. É referência em pesquisas na área da saúde pública. Instituto produtor de soro e vacina. Um centro de excelência não só na produção de diversos insumos para a saúde, mas também em pesquisa e ensino. “A construção de um ideal em saúde pública.” 3 LINHA DO TEMPO 1996 - 2008 No combate ao mosquito da Dengue, Filariose e Malária. Biotecnologia Orientadora: Patrícia da Silva Nascente 2011: Primeira Turma de Mestrado LINHA DO TEMPO Todas as células vivas podem ser classificadas em dois grupos: Procariontes Eucariontes 5 Diferenças entre organismos procariontes e eucariontes: Organismos Eucariontes: Fungos (leveduras e bolores) Plantas Animais ProtozoáriosAlgas 7 Organismos Procariontes: Cianobactérias (algas azuis e verdes) Bactérias Não se encaixam em nenhuma classificação organizacional das células vivas! Vírus 8 BACTÉRIAS Não são todas as bactérias que são potencialmente prejudiciais ao homem, animais ou vegetais. Lactobacillus sp. Na verdade, são poucas espécies de bactérias que causam doenças. Salmonella sp. Importância das bactérias 9 IDENTIFICAÇÃO BACTERIANA Forma Arranjo Coloração 10 Forma 11 Exemplos: Cocos Bacilo Espiroqueta Arranjo cocobacilos bacilos paliçadasdiplobacilos estreptobacilos 13 Coloração Gram Positivas Gram Negativas 14 PAREDE CELULAR - Forma - Proteção - Patogenicidade 16 PAREDE CELULAR Peptideoglicana (mureína) Porção GlicanaPorção Peptídica Poliptedíeos Dissacarídeos NAG NAM Composição Química 17 PAREDE CELULAR DAS BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS 90% da parede é composta por peptideoglicano; Mais espessa e mais simples! 18 19 PAREDE CELULAR DAS BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS Até 50% da parede é composta por peptideoglicano; Mais complexa! Lipoproteínas Peptideoglicana 20 21 PAREDE CELULAR DAS BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS 22 23 PAREDE CELULAR Desenvolvido pelo bacteriologista Hans Christian Joachim Gram em 1884. Coloração de Gram é um método citoquímico, que permite identificar a estrutura molecular da parede celular, diferenciando-a pela simples observação da sua coloração final. COLORAÇÃO DE GRAM Importância Cuidados 25 26 1- Esfregaço: 2- Corante primário: Cristal Violeta. 3- Mordente: Solução de Iodo ou Lugol. 4- Agente descolorante: Álcool ou Acetona ou ambos. 5- Contrastante: Fucsina ou Safranina. TÉCNICA DE GRAM 27 TÉCNICA DE GRAM 1- Preparo e fixação do esfregaço 1 2 3 28 TÉCNICA DE GRAM 2- Corante primário: Cristal Violeta 1 2 O Cristal Violeta (CV) penetra em ambas as células (GRAM + e GRAM -) 29 TÉCNICA DE GRAM 3- Mordente: Solução de Iodo ou Lugol A solução de Iodo fixa o Cristal Violeta na parede celular e forma o complexo CV-I. 1 2 30 TÉCNICA DE GRAM 4- Agente Descolorante: Álcool ou Acetona ou Álcool-Acetona 1 GRAM POSITIVA GRAM NEGATIVA 2 31 TÉCNICA DE GRAM 5- Contracorante: Fucsina ou Safranina GRAM POSITIVA GRAM NEGATIVA 1 2 32 Bactérias Gram Positivas (apresentam cor púrpura) Bactérias Gram Negativas (apresentam cor vermelha) 33 34 COCOS GRAM POSITIVOS 35 BACILOS GRAM POSITIVOS 36 COCOS GRAM NEGATIVOS 37 BACILOS GRAM NEGATIVOS 38 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS JAWETZ, E., MELNICK, J.L., ADELBERG, E.A., BROOKS, G.F., BUTEL, J.S., ORNSTON, L.N., Microbiologia Médica, 18 ed. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan S.A. 1991. TORTORA, G. J., et. al., Microbiologia, 6 ed., Artmed, 2000. gabrielahm73@yahoo.com.br Facebook: Gabriela Henriques Marques 39 MUITO OBRIGADA