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05/12/2012 1 Prof. Dr. José Augusto David Membrana Celular Universidade Federal do Espírito Santo Centro de Ciências Agrárias Departamento de Biologia Disciplina de Citologia e Histologia Geral FUNÇÕES DA MEMBRANA CELULAR -Engloba a célula -Define limites -Mantém diferenças entre citoplasma e meio extracelular -Mantém diferenças entre citoplasma e o interior das organelas -Forma junções entre células vizinhas -Estabelece gradientes iônicos– Proteínas da membrana (síntese de ATP, fluxo de solutos, produção e transmissão de sinais elétricos) -Comunicação e reconhecimento entre células – Proteínas e carboidratos LIPÍDIOS – PROTEÍNAS – CARBOIDRATOS 05/12/2012 2 COMPOSIÇÃO DA MEMBRANA CELULAR EXPERIMENTOS -células animais e vegetais em soluções iônicas concentradas permitem passagem de água mas não permitem a passagem de moléculas solúveis – barreira semipermeável -o fracionamento de membranas mostrou a presença de fosfolipídios, proteínas e carboidratos -fosfolipídeos isolados de eritrócitos humanos em recipientes com água formam camada na superfície com área 2 vezes maior que superfície da célula – bicamada COMPOSIÇÃO DA MEMBRANA CELULAR Singer e Nicolson (1972) – modelo do mosaico fluido – proteínas inseridas na bicamada lipídica – devido a fluidez dos lipídeos as proteínas também se moveriam 05/12/2012 3 -Bicamada lipídica (barreira de permeabilidade seletiva) incrustada por proteínas responsáveis pala maioria das funções - Membranas com mais funções específicas tem mais proteínas -Carboidratos ligados às proteínas ou aos lipídios possuem diferentes funções - principal = comunicação ou reconhecimento celular -Membranas 7,5 a 10 nm de espessura LIPÍDIOS -fosfolipídios = moléculas anfipáticas Cabeça polar (hidrofílicas) 2 caudas apolares (hidrofóbicas) – ácidos graxos -movimentos: flexão, rotação, difusão lateral, flip-flop (flipases ou translocadores de fosfolipídeos) 05/12/2012 4 LIPÍDIOS -fosfatidiletanolamina –fosfatidilserina –fosfatidilcolina -esfingomielina -glicolipídios LIPÍDIOS Distribuição assimétrica dos lipídios de membrana -fosfatilserina -glicolipídios 05/12/2012 5 LIPÍDIOS Os lipídios afetam a fluidez da membrana: -o comprimento das cadeias de hidrocarbonetos -a presença de ligações duplas (insaturações) Temperatura também altera fluidez da membrana Colesterol – molécula plana – anel esteroide rígido – impede deformações – reduz a permeabilidade mas não altera a fluidez PROTEÍNAS FUNÇÕES – transporte de íons e moléculas polares, interação com hormônios, transdução de sinais, estabilização estrutural A função das células está relacionada com a quantidade de proteínas na membrana – bainha de mielina 25%, membrana celular 50%, membrana interna da mitocôndria 75% Proteínas intrínsecas – Proteínas periféricas ou extrínsecas 05/12/2012 6 PROTEÍNAS PROTEÍNAS INTRÍNSECAS – inseridas na bicamada lipídica – domínio citoplasmático, transmembrana, não-citoplasmático -Unipasso – uma única região que atravessa a bicamada -Multipasso – mais de uma região atravessa a bicamada -Proteínas transportadoras de membrana e canais iônicos são multipasso PROTEÍNAS PERIFÉRICAS – interações fracas -podem se ligar a outras proteínas periféricas, proteínas intrínsecas, fosfolipídeos ou a oligossacarídeos ligados a lipídeos CARBOIDRATOS -Estão localizados na face não citoplasmatica (extracelular ou dentro de organelas) -Importante função fisiológica GLICOCÁLICE -reconhecimento molecular e comunicação celular -sistema ABO – variações nos carboidratos dos glicolipídeos e glicoproteínas dos eritrócitos A=hexose modificada N-acetilgalactosamina, B=galactose na mesma posição, AB=tem as duas formas, O=sem estes açúcares 05/12/2012 7 FORMAÇÃO DA MEMBRANA -os lipídeos são sintetizados no retículo endoplasmático liso -são transferidos para a membrana através de vesículas ou por proteínas específicas que fazem o transporte dos lipídeos -as proteínas são sintetizadas no retículo endoplasmático rugoso -são transferidas através de vesículas até a membrana -as moléculas do interior da vesícula passam a fazer parte da parte extracelular da membrana SÍNTESE DOS LIPÍDIOS DE MEMBRANA 05/12/2012 8 SÍNTESE DAS PROTEÍNAS DE MEMBRANA ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA microvilosidades 05/12/2012 9 ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA estereocílios -A adesão celular é extremamente importante para a manutenção de organismos multicelulares -Tem papel importante no processo de desenvolvimento embrionário e na formação e manutenção de tecidos -CAMs (cell adhesion molecules) – glicoproteínas intrínscecas -CAMs estabelecem ligações duradouras – exceção são as dos leucócitos que se fixam temporariamente ao endotélio de vasos sanguíneos nos processos inflamatórios – cicatrização – desenvolvimento embrionário -caderinas – tipos de CAMs dependentes de íons cálcio – perdem adesão em níveis baixos de cálcio -quando células normais se transformam em malignas elas perdem adesividade, podem cair na corrente sanguínea e formar tumores distantes chamados de metástases ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Adesão celular 05/12/2012 10 ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Adesão celular -3 grupos de estruturas juncionais: 1)estruturas que unem fortemente células ou células/matriz extracelular (desmossomos, hemidesmossomos, junções aderentes, adesão focal); 2) estruturas que promovem vedação entre as células (junção oclusiva ou junção compacta) 3) estruturas que estabelecem comunicação entre células (junção comunicante ou gap junciton ou junção tipo fenda) ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Adesão celular 05/12/2012 11 ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Desmossomos -placas arredondadas -unem o citoesqueleto de células vizinhas – filamentos intermediários se ligam às proteínas de ligamento da placa citoplasmática -proteínas – caderinas – Ca+2 -frequentes em células que sofrem trações como epiderme, revestimento de língua e esôfago, músculo cardíaco -formam-se com facilidade em culturas e desaparecem facilmente em transformações malignas ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Desmossomos 05/12/2012 12 ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Hemidesmossomos ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Junção aderente -anel na região apical da célula -epitélios de revestimento forma um cinturão por toda a célula – zônula aderente -no citoplasma é encontrado material amorfo eletron-denso como nos desmossomos, porém menos compacto -neste material se ancoram microfilamentos de actina – contráteis -também é dependente de cálcio 05/12/2012 13 ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Junção oclusiva ou compacta -tem a função de vedar o espaço intercelular -forma anel próximo ao topo das células -impede a passagem de íons e moléculas -substâncias são obrigadas a passar pelo interior da célula, sendo controladas por ela -forma potenciais elétricos – diferença de potencial iônico nas duas camadas do epitélio ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Complexo juncional -encontrado em vários epitélios na região apical das células -formado por zônula de oclusão, junções aderente, fileira de desmossomos -estrutura de adesão e vedação do epitélio -constituintes do citoesqueleto se dispõem nessa região ligando-se aos constituintes do complexo juncional formando a trama terminal 05/12/2012 14 ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Junção comunicante -permite a comunicação entre as células vizinhas fazendo com que elas funcionem de modo coordenado -constituída por conjunto de tubos protéicos que atravessam a membrana das duas células -podem passar pelos tubos – nucleotídeos, aminoácidos e íons -não passam macromoléculas como ácidos nucléicos ou proteínas -as junções podem alterar a permeabilidade entre as células vizinhas -proteínas canais (conexinas) – 6 conexinas formam um canal (conexon) – conexons de duas células formam canais intercelulares ESPECIALIZAÇÕES DE MEMBRANA Junção comunicante 05/12/2012 15 Prof. Dr. José Augusto David Transporte através da membrana Universidade Federal do Espírito Santo Centro de Ciências Agrárias Departamento de Biologia Disciplina de Citologia e Histologia Geral Permeabilidade da BICAMADA LIPÍDICA DIFUSÃO PASSIVA -todas as moléculas tendem a atravessar a membrana para seu equilíbrio -fatores que influenciam a travessia: TAMANHO DA MOLÉCULA, SOLUBILIDADE EM LIPÍDEOS -pequenas moléculas não polares – O2 e CO2 -pequenas moléculas polares sem carga – água ou uréia ou glicerol -moléculas carregadas (íons) – Na+ e K+ – carga e alto grau de hidratação 05/12/2012 16 Classes de proteínas transportadoras -especificidade de moléculas -todas são multipasso – permitem que solutos hidrofílicos atravessem sem entrar em contato com a região hidrofóbica da membrana -proteína transportadora ou carreadora (permease) – sofrem mudança conformacional -proteína canal – interagem fracamente com o soluto – formam poros aquosos por onde passa o soluto TRANSPORTE PASSIVO OU DIFUSÃO FACILITADA – realizado por proteínas canal e carreadoras – a favor da diferença de concentração TRANSPORTE ATIVO – realizado por proteínas carreadoras – bombeamento contra gradiente eletroquímico – está acoplado a uma fonte de energia metabólica (ATP) ou a um gradiente de íons 05/12/2012 17 Transporte ativo O transporte ativo pode ser realizado de 3 maneiras: 1-carreador acoplado – um a favor do gradiente e outro contra 2-bombas acionadas por ATP – hidrólise de ATP fornece energia 3-bombas acionadas por luz – principalmente em bactérias Transporte ativo -uniporte – transporte de um único soluto pela membrana TRANSPORTE IMPULSIONADO POR GRADIENTES IÔNICOS -simpote e atiporte – dois solutos transportados ao mesmo tempo – a energia armazenada no gradiente eletroquímico de um soluto é utilizada para transportar outro soluto 05/12/2012 18 Transporte ativo Bomba de Na+ e K+ -concentração de K+ é muito maior DENTRO da célula -concentração de Na+ é muito maior FORA da célula -bomba antiporte – Na+ pra fora e K+ pra dentro – a bomba gasta ATP – sendo conhecida como Na+K+ ATPase -o gradiente de sódio impulsiona o transporte de muitos nutrientes -um terço da energia gasta pela célula é utilizado para este transporte -a bomba pode funcionar na forma inversa sintetizando ATP se, experimentalmente, for alterada a concentração de íons 05/12/2012 19 Tranporte em quantidade = ENDOCITOSE Pinocitose e fagocitose -ingestão de grandes moléculas em suspensão – proteínas, polissacarídeos, polinucleotídeos – PINOCITOSE -ingestão de partículas grandes – macroscópicas – bactérias, células mortas – FAGOCITOSE -PINOCITOSE – vesícula pequenas - pinocítica – 100 a 200nm -FAGOCITOSE – grandes vesículas = fagossomos – maiores que 250nm -PINOCITOSE – realizada por quase todos os tipos celulares -FAGOCITOSE – células fagocitárias especiais – células de defesa – macrófagos – células-tronco hematopoiéticas Pinocitose Cavéolos – região da membrana rica em colesterol e caveolina (proteína de membrana) – composição lipídica Fossas revestidas por clatrina – proteína que reveste a membrana na face citosólica – fossa tem vida curta e vesícula também 05/12/2012 20 Fagocitose -para ser fagocitada uma partícula tem que se ligar a superfície do fagócito -receptores de superfície especializados -anticorpo se liga a agente infeccioso formando revestimento com a cauda (região Fc) para exterior -receptores de Fc localizados nas membranas dos macrófagos reconhecem o agente e emitem pseudópodes para englobar o agente OUTROS RECEPTORES -reconhecem oligossacarídeos da superfície de microorganismos -células que morreram por apotpose – perdem assimetria de fosfolipídeos – fosfatidilserina carregada negativamente é colocada pro lado não-citoplasmático