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Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 Apresentação Todo ser vivo depende de reações bioquímicas complexas para se desenvolver. Nesta aula, você reconhecerá que muitas reações de síntese e produção de moléculas de ATP encontradas em células procarióticas estão adaptadas a micro- organismos eucarióticos e organismos pluricelulares. Por isso, conhecer os fatores e as condições de crescimento auxilia no cultivo de células no laboratório e no conhecimento das nossas próprias células. A biotecnologia pode ser considerada a aplicação direta desses conhecimentos. Objetivos Definir reações catabólicas e anabólicas nos micro-organismos; Reconhecer as vias para obtenção de energia em bactérias; Classificar as condições para o crescimento de micro-organismos. Metabolismo: quebras e sínteses Todo organismo precisa colocar em ação um número x de reações para se manter vivo. São reações para retirar energia de algum nutriente, repor algum componente consumido e estocar algum composto energético. São muitas - e todas elas, importantes. Não existe desperdício nos sistemas biológicos. Por isso, muitas dessas reações estão conectadas com outras vias de reação para fornecer mais de uma ação para a célula. O conjunto dessas reações é denominado metabolismo. Uma reação que gera a quebra de uma molécula maior, como, por exemplo, um polissacarídeo, automaticamente vai estar acoplada com uma reação de construção de alguma estrutura. Em bioquímica, há as reações de: 1 Quebra Catabólicas ou .degradativas 1 Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 2 Síntese Anabólicas ou biossintéticas. O metabolismo ideal existe quando as reações de quebra estão em equilíbrio com as reações anabólicas. Nas reações que envolvem a quebra de ligações químicas, ocorre a liberação da energia. Mas como ela pode ser consumida pela célula? Se uma ligação química é rompida, essa energia condicionada não sai simplesmente como um gás. Uma possibilidade seria transferir a energia para uma reação de síntese, correto? Para isso, é preciso que exista um elo entre essas duas condições. A resposta está na molécula de ATP: trifosfato de adenosina. Fonte: Shutterstock Molécula de ATP: trifosfato de adenosina No metabolismo energético da célula, a molécula de ATP libera o último fosfato inorgânico, transformando-se em ADP e Pi, o fosfato inorgânico. Não existe estoque de ATP porque o processo é extremamente dinâmico: a todo momento, uma molécula de ADP está se ligando a um Pi para reter (ou quebrar) uma ligação altamente energética. Dica Lembre-se das reações que precisam de uma entrada de energia: as endergônicas. São elas que utilizam o ATP, rompendo essa última ligação covalente para fornecer a energia de ligação para a síntese de alguma molécula. Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 Síntese e clivagem da molécula de ATP. | ShutterstockFonte: O ATP pode ser formado de duas maneiras: 1. Fosfato é retirado de um substrato e se liga a um ADP : processo conhecido como fosforilação em nível de substrato; 2. Com o auxílio de uma enzima ATPase 2: cujo rendimento de moléculas de ATP é bem superior. Glicólise A melhor forma de compreender o conceito de catabolismo é explorar uma de suas principais vias metabólicas: a glicólise 3 Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 A glicólise é o carboidrato que a maioria dos micro-organismos utiliza como fonte primária para obtenção de energia – em seguida, vêm os lipídeos e as proteínas. Para produzir energia, os micro-organismos utilizam dois processos: 1. Fermentação; 2. Respiração celular (ou, simplesmente, respiração). Ambos começam a partir do mesmo ponto: glicólise. Trata-se de uma via metabólica com várias reações que transformam um carboidrato de seis carbonos em duas moléculas de três carbonos, o ácido pirúvico. Nas onze reações que levam à formação de ácido pirúvico, são produzidas duas moléculas de: 1. ATP (através de fosforilações em nível de substratos); 2. NADH. A glicólise consiste de dois passos básicos: Clique nos botões para ver as informações. Fase preparatória Fase de recuperação de energia Há a oxidação dessas moléculas em duas moléculas de ácido pirúvico com ganho final de duas moléculas de ATP. Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 Visão geral das reações da glicólise. | Fonte: Shutterstok Se o micro-organismo é aeróbio, o ácido pirúvico será guiado para reações que transferem elétrons até o oxigênio. Se o micro-organismo é anaeróbio, no lugar do oxigênio entra outra molécula, como, por exemplo, o íon nitrato (NO ) no gênero 3 - Pseudomonas 4. Ciclo de Krebs A etapa seguinte à da glicólise é o ciclo do ácido cítrico ou ciclo de Krebs. Nele, o ácido pirúvico reage com a coenzima A (CoA), perdendo 1C e formando acetil- CoA. O oxaloacetato, um composto renovável do ciclo de Krebs, reage com o acetil-CoA, formando o ácido cítrico e liberando a coenzima A, que será utilizada novamente. São 10 reações que recuperam ao final o oxaloacetato, gerando, a cada entrada de molécula de ácido cítrico, a liberação de: 1 Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 Quatro moléculas de CO2 para o ambiente. 2 Seis moléculas de NADH. 3 Duas moléculas de FADH2. 4 Duas moléculas de ATP (geradas em nível de substrato). O ciclo de Krebs, na verdade, é uma encruzilhada metabólica que gera produtos utilizados pela bactéria para os mais variados fins. E uma das funções mais importante dessa etapa é a saída das coenzimas reduzidas NADH e FADH para entregar esses elétrons2 a um sistema de moléculas carreadoras. Veja a sequência das reações do ciclo de Krebs na figura a seguir e confirme se o mais importante é mesmo a geração de energia pelo ATP. Parece que não. Há dez reações e produção de duas moléculas de ATP. Visão geral do ciclo do ácido cítrico ou ciclo de Krebs. | ShutterstockFonte: Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 Na figura, repare que as enzimas desidrogenases trabalham com as coenzimas NAD+ e FAD+, tornando-as reduzidas. As moléculas carreadoras de elétrons podem até ser diferentes entre os procariotos, mas ao final sempre vai existir uma enzima ATPase. Como já foi comentado neste curso, a ATPase é um dos ganhos evolutivos mais conservados entre os seres vivos: tamanha é a sua importância que nós e as bactérias aeróbias compartilhamos o mesmo processo em relação a ela. Quando os H alcançam essa enzima, ela torna-se ativada, fazendo a ligação entre ADP e + Pi. É a fosforilação oxidativa, pois a formação de ATP está acoplada às reações de oxidação. A configuração dessa enzima é tão especial que permite que os H+ passem pelo seu interior,mudando a sua configuração inativa para ativa. São produzidas 38 moléculas de ATP por hexose. Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 Micro-organismos anaeróbios Não existem todas as reações do ciclo de Krebs porque eles não possuem todos os aceptores dos aeróbios. Isso faz com que esses micro-organismos produzam menos energia, o que explica seu crescimento ser mais lento que o dos aeróbios. Organismos fermentadores Não há o ciclo de Krebs nem a cadeia de transporte de elétrons. Grande parte da energia fica na estrutura da molécula final (álcool ou lactato), gerando somente uma ou duas moléculas de ATP. Fermentação lática Os gêneros e realizam a fermentação lática, Streptococcus Lactobacillus utilizando NADH para reduzir duas moléculas de ácido pirúvico a duas de ácido lático. Como só produzem ácido lático, eles são denominados homoláticos. São esses micro-organismos que deterioram os alimentos, mas eles também geram o iogurte a partir do leite e outros alimentos comercializados pela indústria alimentícia. Fermentação alcoólica Já a produz duas moléculas de acetaldeído e duas de CO2 do ácido pirúvico. O acetaldeído vai dar origem ao etanol. Dois exemplos: a levedura , que serve para a produção de álcool e Saccharomyces cervisae bebidas, e o CO2, para o crescimento do pão. Segundo bons padeiros italianos, a (fermentação do pão) deve levar no mínimo oito lievitazione horas. Repare como a massa dobra de tamanho, ficando bem fofa e volumosa. A fermentação, há muito tempo, é estudada e controlada. Exemplos: seleção de uvas, tempo de e extrato de malte para fermentação dos vinhos 5 as cervejas. Fonte: Shutterstock Características dos Micro-organismos Micro-organismos são classificados de acordo com: 1) Fonte de energia: Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 1 Fototróficos Fonte primária de energia é a luz. 2 Quimiotróficos Utilizam compostos orgânicos e inorgânicos que serão reduzidos. 2) Fonte de carbono: Clique nos botões para ver as informações. Autotróficos Heterotróficos ou organotróficos Dependem de outros seres para obter carbono. São todos os animais, a maioria dos fungos, os protozoários e as bactérias. A maioria é patogênica para o homem. A combinação dessas duas classificações (fonte de energia e fonte de carbono) dá origem a quatro seres vivos: Fotoautotróficos Fotoheterotróficos Quimioautotróficos Quimioheterotróficos 3) Temperatura Fator determinante para o crescimento de micro-organismos, e todos possuem uma temperatura mínima, ótima e máxima. Impresso por Marcos Vinícius Leão Silva, E-mail marcos.leao@passeidireto.com para uso pessoal e privado. Este material pode ser protegido por direitos autorais e não pode ser reproduzido ou repassado para terceiros. 28/10/2024, 18:00:40 Temperatura mínima que funciona como barreira: abaixo dela, não é possível ele se dividir. Já a temperatura máxima acabaria desnaturando suas proteínas, levando o micro-organismo à morte. Fonte: Shutterstock. HÁ EXCEÇÕES Existem micro-organismos adaptados para viver em ambientes que a maioria dos seres vivos não suportaria. São os micro-organismos extremófilos. Eles vivem, por exemplo, em zonas vulcânicas ou hidrotermais marinhas do planeta. Vamos conhece-los? Temperaturas baixas Psicrófilos 6: crescem a 4 °C ;