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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS FACULDADE DE MEDICINA 3ª AULA PRÁTICA DE BIOQUÍMICA: PROPRIEDADES DAS ENZIMAS I 4ª AULA PRÁTICA DE BIOQUÍMICA: PROPRIEDADES DAS ENZIMAS II Fernanda Vilas Boas de Freitas Fernando Amata Mudado Fernando Antônio da Silva Cifuentes Fernando César Teixeira Filipe Ferreira Lemos Flávio dos Santos Campos Flávio Henrique de Souza Ribeiro Belo Horizonte Maio de 2010 Relatório de Bioquímica Trabalho prático de Propriedades das Enzimas 01 – Fazer um gráfico mostrando a atividade enzimática em função da concentração de enzima. A imagem abaixo evidencia uma gradação de tons alaranjados nos três primeiros tubos. No primeiro, a concentração de enzima é de 10% V/V, e o tom da cor é mais escuro. No segundo tubo, de concentração enzimática igual a 25% V/V, a cor é intermediária. O terceiro tubo apresenta um tom 02 – Fazer um gráfico teórico da atividade enzimática em função da temperatura e indicar no mesmo a parte observada experimentalmente. A imagem abaixo evidencia o aumento da atividade enzimática com o aumento da temperatura, como explicitado no gráfico. A solução do tubo três apresenta uma coloração mais acentuada que as soluções nos demais tubos demonstrando que nesse tubo a hidrólise a 37ºC foi mais efetiva por esse ser a temperatura fisiológica, na qual a pespesina tem sua temperatura ótima de atuação. 03 – Fazer um gráfico teórico da atividade enzimática em função do pH e indicar no mesmo a parte observada experimentalmente. A imagem abaixo evidencia o aumento da atividade enzimática na solução de pH igual a 1,5. A solução do tubo 1, portanto, apresenta uma coloração mais acentuada que a solução no tubo 2, de pH aproximadamente igual a 7. 04 – Das propriedades estudadas nesse trabalho prático, aquela que é mais característica da catálise enzimática é: especificidade enzimática. 04 – Das propriedades estudadas neste trabalho prático aquela que é mais característica da catálise enzimática é: Especificidade enzimática. 05 – Explicar por que o aquecimento, até a fervura, determina perda de atividade das enzimas. Com o aumento da temperatura a proteína perde a sua estrutura tridimensional e desnatura-se. Essa desnaturação afeta as interações fracas de forma que a conformação protéica sofre uma perda abrupta de estrutura em determinada faixa de temperatura, o que sugere que o desenovelamento é um processo cooperativo: a perda de estrutura em uma parte da proteína desestabiliza as outras partes. 06 – Citas as enzimas, seus respectivos substratos e produtos que foram utilizados neste trabalho prático. Enzimas Substratos Produtos Amilase salivar Amido Maltose Sacarase Sacarose Glicose e frutose Pepsina Fibrina Proteoses e peptonas [enzima] (%V/V) Atividade enzimática 10 25 50 Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Atividade enzimática T (ºC) Temperatura ótima (tubo 3) 37 1 2 3 pH Atividade enzimática 1,5 7 Tubo 1 Tubo 2 1 2