1CHG 2012

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30/11/2012 
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Prof. Dr. José Augusto David 
Citologia e Histologia Geral 
Introdução 
Universidade Federal do Espírito Santo 
Centro de Ciências Agrárias 
Departamento de Biologia 
Disciplina de Citologia e Histologia Geral 
Citologia 
-estudo dos componentes celulares 
-interação entre estes componentes e o meio 
extracelular 
 
Histologia 
-estudo dos tecidos do corpo 
-Tecidos = Células + Matriz extracelular (MEC) 
-4 tecidos fundamentais – epitelial, conjuntivo, 
muscular, nervoso 
-cada tecido apresenta células com 
características e interações específicas com a 
MEC 
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Diversos tipos de microscópios para análise de células e 
tecidos: 
-microscópio de luz 
- microscópio de contraste de fase 
- microscópio de polarização 
- microscópio confocal 
- microscópio de fluorescência 
- microscópio eletrônico de transmissão 
- microscópio eletrônico de varredura 
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Microscópio de luz 
Microscópio eletrônico de transmissão 
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Microscópio eletrônico de varredura 
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Para realização de estudos citológicos e histológicos o 
tecido deve ser visível ao microscópio 
Preparação de tecidos: 
dissecção, 
fixação, 
desidratação, 
clarificação, 
embebição, 
inclusão, 
microtomia, 
coloração. 
Fixação 
-evitar digestão dos tecidos 
-endurecer 
-preservar estrutura e composição 
 
-Química (soluções fixadoras) 
-agentes desnaturantes ou que estabilizam as moléculas, formando 
pontes com moléculas vizinhas (formaldeído, glutaraldeído, 
tetróxido de ósmio) 
 
-Física 
-congelamento rápido 
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Desidratação, clarificação, embebição, inclusão, microtomia 
Processos que visam o endurecimento do fragmento de tecido a fim 
de facilitar a microtomia. 
 
desidratação -série crescente de álcool 
clarificação -série de xilol 
embebição 
inclusão -parafina ou resina 
microtomia 
1 a 10 micrômetros de espessura = MO 
40-90 nanometros de espessura = MET 
1mm = 1.000μm = 1.000.000nm 
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Preparação de tecidos (fixação, desidratação, clarificação, 
embebição, inclusão, microtomia, coloração) 
 
Coloração 
Estruturas celulares interagem da mesma forma com a luz, não 
demonstrando contraste suficiente para diferenciação das estruturas 
celulares. 
Corante - uma substância que possui cor e capacidade de ligação a 
grupos químicos específicos das células. 
Grupos cromóforos – capazes de absorver raios luminosos de 
determinado comprimento de onda – corante vermelho absorve luz 
de comprimento de onda de outras cores deixando somente o 
vermelho passar 
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Botão gustativo 
Hematoxilina/eosina 
 
Basófilas=roxo 
Acidófilas=rosa 
Coloração 
Corantes interagem eletrostáticamente 
por seus radicais ionizáveis: 
-corante aniônico com carga negativa 
(ácido) – exemplo – Eosina 
-corante catiônico com carga positiva 
(básico) – exemplo – Hematoxilina 
Coloração 
Ácidos nucleicos (DNA e RNA) – carga negativa devido aos grupos 
fosfato – afinidade a corantes básicos como a hematoxilina – núcleo 
da célula que possui DNA é chamado de basófilo 
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Histoquímica 
Histoquímica 
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Interpretação de cortes 
As várias etapas de processamento para obtenção das lâminas 
observadas podem distorcer os tecidos, fornecendo uma 
imagem que pode diferir da que os tecidos apresentavam 
quando vivos. 
Artefatos de técnica 
-retração – fixadores, desidratação, calor 
-perda de moléculas – não fixadas ou removidas – lipídios do 
tecido adiposo 
-pregas no corte 
-precipitados de corante 
-sujeira 
Retração Perda de moléculas 
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Interpretação de cortes 
Duas dimensões e três dimensões