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Alimentos ► meio adequado para o crescimento microbiano - deterioração (“prontos para consumo”) - aumento dos custos - disseminação de infecções - intoxicações - produção de alimentos - conservação de alimentos Microbiologia dos Alimentos ► Frutos: Leveduras na casca das uvas - fermentação para fabricação do vinho (pH 2,3-5,0 - baixa incidência de bactérias) ► Carnes: Corte e manuseio - bactérias proteolíticas, lipolíticas, fungos e ocasionalmente patógenos (Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus) ► Leite: Microbiota característica do ambiente Bactérias do ácido lático, leveduras, coliformes, Pseudomonas Patógenos: Staphylococcus (mastite), Mycobacterium, Brucella, Salmonella, Coxiella Composição microbiana dos alimentos Deterioração: ► Qualquer alteração na aparência, odor, sabor decorrentes da atividade metabólica dos microrganismos O tipo de deterioração depende: - tipo de alimento - microrganismo envolvido (bactérias entéricas raramente deterioram frutos) - número de microrganismos presentes Microrganismos e a deterioração de alimentos ► Ranço: Alimentos ricos em gordura Microrganismos lipolíticos, principalmente bactérias Quebra das gorduras→ácidos graxos → glicerol ► Putrefação: Alimentos ricos em proteínas (p.ex. carnes) Bactérias proteolíticas Proteínas → putrescina, cadaverina, H2S, NH3 ► Azedamento (fermentação) e coagulação: Leite: bactérias do ácido lático Lactose → ácido lático + outros ácidos Principais processos de deterioração de alimentos Inibir o crescimento microbiano ► preservar a qualidade • O crescimento segue o padrão geral: fase lag, exponencial ... • Depende de condições como temperatura e valor nutritivo do alimento • Somente quando a concentração atingir certo nível a deterioração pode ser observada Controle dos microrganismos em alimentos ► Forma mais comum de conservação Refrigeração (4 a 10 ºC): inibição das reações enzimáticas, levando à paralisação do crescimento microbiano - Crescem os psicrotolerantes Congelamento (-20 ºC): água congelada não está disponível para o metabolismo. Formação de cristais de gelo que danificam a membrana - Pode haver crescimento em bolsas de água não congelada Frio Processos de preservação ► Pasteurização 63 ºC por 30 min (LTLT: low temperature long time) 72 ºC por 15 s (HTST: high temperature short time) O tempo e temperatura, estão definidos para eliminação da Coxiella burnetti (patógeno mais resistente – 61,6 °C) ► Esterilização UHT (ultra-high temperature): 150 ºC por até 3 s sistemas contínuos elimina o gosto de leite cozido Calor ►Secagem: sol, câmaras secagem, liofilização alimentos perdem água, provocando a inibição do crescimento ►Adição de solutos (elevação da pressão osmótica) - adição de açúcar: doces, geléias, - secagem: leite condensado, frutas secas - adição de sal: carnes e peixes - defumação Redução da atividade água (Aw) Atividade de água e crescimento de microrganismos em alimentos Valor de aw Microrganismos geralmente Alimentos que apresentam inibidos nesse valor esses valores de Aw 0,95 Pseudomonas, Escherichia, Proteus Alimentos frescos altamente Shigella, Klebsiella, Bacillus perecíveis e frutas, carnes, Clostridium perfringens, algumas peixes e leites enlatados; leveduras salsichas cozidas e pães; alimentos contendo 40% de sacarose ou 7% de NaCl 0,95-0,91 Salmonella, Vibrio parahaemolyticus Alguns queijos, carne curada, alguns C. botulinum, Serratia, Lactobacillus sucos de frutas concentrados, Pediococcus, alguns bolores, alimentos contendo 50% de leveduras (Rhodotorula, Pichia) sacarose ou 12% de NaCl 0,91-0,87 Muitas leveduras (Candida, Torulopsis Salame, Bolos, queijos secos, Hansenula), Micrococcus margarian, alimentos com 65% de sacarose ou 15% de NaCl 0,87-0,80 Maioria dos bolores (Penicilium Maioria dos sucos de frutas micotoxigênicos), S. aureus, concentrados, leite condensado maoria das Saccharomyces, adoçado, xaropes de chocolate Debaryomyces e de frutas, farinha, arroz, grãos secos, bolos de frutas 0,80-0,75 Maioria dos procariotos halofílicos Presunto, geléias, marzipan, frutos Aspergillus micotoxigênicos glacês, marshmallows Fonte: Adaptado de Beuchat (1981) ► Diminuição do pH do alimento A maioria dos organismos deteriorantes não crescem em menos de pH 5. O ácido pode ser adicionado ou produzido no processo - ácido acético: picles - ácido lático: leite fermentado, iogurte, chucrute Acidificação Nos alimentos fermentados, as bactérias não se desenvolvem bem em pH abaixo de 4 – processo autolimitante. Enlatamento - Nicholas Appert funda em 1802 a primeira fábrica de conservas e recebeu o prêmio de Napoleão. ►Altas temperaturas aplicadas a alimentos hermeticamente fechados em latas - Temperatura inadequada: problemas com os termofílicos anaeróbios - Deteriorações mais comuns em enlatados: - azedamento: Bacillus stearothermophillus, B. coagulans, Lactobacillus spp. - produção de gás: leveduras, lactobacilos, clostrídios Um pouco de história: Em 1795 o governo de Napoleão Bonaparte ofereceu um prêmio de 12 mil francos a quem inventasse um novo método de preservação de alimentos para o exército. Radiação ionizante: raios gama (cobalto 60) ▪ sem radiação residual e sem afetar a qualidade Atualmente, nos EUA, aves e hambúrgueres estão sendo irradiados para controlar a E. coli 0157:H7 e outros patógenos entéricos Irradiação 44 KGrays na esterilização de produtos cárneos servidos em vôos espaciais (NASA) 4,4 KGrays para hambúgueres normais Aditivos Alguns são utilizados há anos, sem evidência de toxicidade, outros já são mais controvertidos. * inorgânicos: - Óxido de etileno, NO3 -, NO2 - * orgânicos: - ácido ascórbico: laticínios, sucos - benzoato de sódio: refrigerantes - propionato de cálcio: pães Em combinação com o ácido ascórbico (Vitamina C), o benzoato de sódio pode formar o benzeno, que é cancerígeno. Microrganismos na produção de alimentos Alimentos preparados com o uso de microrganismos Alimento Matéria prima Principal Microrganismo Grupo Picles Pepinos Lactobacillus spp. Pediococcus spp. Bacilos, Gram + Cococ, Gram + Leite fermentado Leite L. acidophilus Bacilos, Gram + Pão Farinha Saccharomyces cerevisiae Levedura Ricota Leite pasteurizado L. bulgaricus Bacilos, Gram + Koumiss Leite de égua L. bulgaricus Torula, Mycoderma Bacilos, Gram + Leveduras Kefir Leite fresco, Streptococcus spp. Lactobacillus spp. Leuconostoc Acetobacter Cocos, Gram + Bacilos, Gram + Cocos, Gram + Bacilos, Gram - Iogurte Leite pasteurizado L. bulgaricus S. thermophilus Bacilos, Gram + Cocos, Gram + Shoyu Arroz, Soja L. delbrueckii Aspergillus oryzae Sacharomyces rouxii Bacilos, Gram + Fungo filamentoso Levedura Queijos Leite S. lactis S. cremoris L. citrovorum L. dextranicum Outros microrganismos Cocos, Gram + Cocos, Gram + Bacilos, Gram + Bacilos, Gram + Fungos Cerveja Grãos de cereais Saccharomyces spp. Leveduras Vinho Suco de uva Saccharomyces cerevisiae Sacch. champagnii Leveduras Salames e salsichas curadas Porco/Gado Pediococcus cerevisiae Cocos, Gram + Presunto curado Porco Aspergillus, Penicillium Fungos Iogurte Lactococcus thermophillus Lactobacillus bulgaricus Sabor: diacetil, acetaldeído Queijos Lactococcus lactis Lactococcus cremoris Lactobacillus citrovorum Lactobacillus dextranicum Outros: fungos Creme de Leite Streptococcus cremoris, S. diacetylactis: ácido – coagulação Leuconostoc cremoris: voláteis – sabor e aroma Manteiga: mesmos microrganismos Saccharomyces cerevisiae Leveduras são resistentes a altas concentrações de etanol e por isso dominam a fermentação alcoólica; Mecanismo da Fermentação Alcoólica: Uma seqüência de reações em 14 fases, envolvendo 15 enzimas e 3 coenzimas. As reações incluem transferência de fosfato, oxidação-redução, descarboxilação e isomerização além de outras. C6H12O6 2C2H5OH + 2CO2 fermentação Acetobacter xilynum Picles Lactobacillus spp. Pediococcus spp. Chucrute Doenças transmitidas por alimentos • Importante área emergente • Alimentos processados: grande responsabilidade para as empresas • Infecções e intoxicações originadas por uma única fonte pode afetar grande número de indivíduos Categorias de doenças: * infecções - microrganismo ativo presente nos tecidos - ingestão do patógeno através do alimento contaminado (muitos desses agentes também são transmitidos pela água) * intoxicações - microrganismo ativo ausente nos tecidos - ingestão da toxina bioativa pré-formada Doenças de origem microbiana veiculadas por alimentos Infecções a. Gastroenterites Bacillus cereus: toxina liberada no trato intestinal Infecção que atinge o sistema gastrointestinal ocasionando diarréias, cólicas intestinais e vômitos. - decréscimo na absorção de fluidos - aumento da secreção de fluidos do sangue para o intestino Vegetais crus, carnes, leite e derivados, farinhas contendo esporos Infecções b. Salmoneloses Salmonella thyphimurium: espécie mais comum, presente no intestino dos animais e esgotos. S. typhi: febre tifóide Carnes, salsichas, aves, ovos, leite e laticínios, produtos à base de ovos crús Contaminação: manuseio por indivíduos portadores, água contaminada c. Escherichia coli patogênicas Escherichia coli enterotóxica (linhagens ETEC), produtora de enterotoxinas potentes - verotoxina:diarréia hemorrágica e insuficiência renal. Linhagem E. coli O157:H7 produz grande quantidade da toxina Alimentos crús ou mal cozidos, particularmente carnes moídas processadas em grande escala, água. d. Campilobacteriose Campylobacter jejuni e C. fetus Bastonetes Gram negativos, microaerófilos, principais responsáveis por diarréias bacterianas em crianças - C. fetus: abortos em bovinos e ovinos Aves, porco, mariscos crús - todas as carcaças de frango e peru contêm C. jejuni d. Listeriose Listeria monocytogenes – presente em todos os ambientes - Bastonetes ácido tolerantes, psicrotolerantes e halotolerantes - Pessoas imonocomprometidas: septicemia, meningite, encefalite, infecção intra-uterina Carne, laticínios, produtos frescos Contaminação: solo, água e. Hepatite A Picornavírus (RNA vírus) - Inflamação e necrose do fígado Frutos do mar coletados em águas poluídas, leite Contaminação fecal da água ou alimento a. Intoxicação por estafilococos Staphylococcus aureus – intoxicação bastante comum (gastroenterites) Cremes, doces recheados, carnes, pudins, saladas com maionese Contaminação do alimento: pelo manipulador, seguida pela multiplicação da bactéria no alimento não refrigerado e produção de enterotoxinas (7 tipos) termoestáveis. b. Intoxicação por clostrídios Clostridium perfringens: bactéria anaeróbia, produtora de endósporos - Carnes, aves e peixes, crús ou cozidos Toxinas: enterotoxina produzida quando a bactéria esporula no intestino, após ser ingerida com o alimento. Sintomas: alteração da permeabilidade das células epiteliais do intestino, produzindo sintomas de gastroenterites. Intoxicações Clostridium botulinum: bactéria anaeróbia, produtora de endósporos (botulus, do latim, salsicha) Carnes, vegetais enlatados, peixes fermentados, alimentos embutidos, batatas assadas, ... Toxinas: exotoxina geralmente fatal - (proteína sensível ao calor, 80ºC/10 min). - 1 g mataria 30 bilhões de ratos. Botulismo Sintomas: a toxina liga-se às membranas pré- sinápticas nos neurônios motores na junção neuro-muscular, bloqueando a liberação de acetilcolina, impedindo a contração do músculo. Cuidados no acondicionamento. Altas temperaturas Controle Danos hepáticos e hemorrágicos no sist. Gastrointestinal. Hepatocarcinogênicas. Lesões renais Caract da dça Aflavotoxinas, ocratoxinasPatologia Sementes de cereias, amendoin, castanha, café, trigo, aveia Epidemiologia Bolores, mesófilos, aeróbicosCaract. do micror AspergillusMicrorganismo Fungos Armazenamento correto de cereais.Controle Toxinas estáveis em condições ácidas. Afeta os rins, convulsões, vômitos, efeitos colaterais no sist. respiratório Caract da dça Rubratoxinas Citrina, patulina Citreoviridina Patologia Presente no milho e arroz amarelo (oriental) Epidemiologia Bolores, mesófilos, aeróbicosCaract. do micror PenicilliumMicrorganismo Fungos Ocorrem em condições climáticas frias e de alta umidade Tolerantes a altas temperaturas Controle Aleucia tóxica alimentar (destruição da medula óssea), leucemia, hemorrágias Síndrome estrogênica dos suínos Caract da dça Tricocenos, fumonisinas, zearalenonaPatologia Trigo, cevada, aveia, centeio, milho, Epidemiologia Bolores, mesófilos, aeróbicosCaract. do micror FusariumMicrorganismo Fungos Toxinas termolábeisControle Ergotismo gangrenoso (queimação nos pés e mãos) e ergotismo convulsivo (neurotóxina) Caract da dça Micotoxina denominada ergotismoPatologia Cereais de invernoEpidemiologia Bolores, mesófilos, aeróbicosCaract. do micror ClavicepsMicrorganismo Fungos INOCULANTE DE SILAGENS Cultivo Corte Tamanho da partícula Carregamento Compactação Vedação Fermentação ETAPAS DO PROCESSO Ponto da colheita : Envolve a maturidade da planta e seu conteúdo de umidade. Cerca de 30% massa seca Tempo de carregamento: Deve ser realizado dentro do menor espaço de tempo possível evitando ser interrompido por mais de 24 horas consecutivas. Tamanho de partículas permite: Deve ser realizado dentro do menor espaço de tempo possível evitando ser interrompido por mais de 24 horas consecutivas. •Compactação: Tem o objetivo de expulsar o ar que diminui a fase aeróbica da fermentação e favorece o desenvolvimento das bactérias produtoras de ácido láctico. Vedação: Deve ser perfeita, evitando a entrada de ar e água. Conservação: passa por dois pontos primordiais: A remoção do ar. Queda do pH. Os inoculantes são produtos compostos normalmente por enzimas e bactérias com finalidade de ajudar na preservação da forragem ensilada. Suas ações através da rápida diminuição do pH do meio, diminuindo as fermentações indesejáveis e estimulando a produção do acido lático conferem a esses produtos grande eficiência no processo de ensilagem de todas as forrageiras. COMPOSIÇÃO DOS PRODUTOS PARA TRARAMENTO DE SILAGEM Lactobacillus plantarum Lactobacillus acidophilus Pediococcus acidilactici Enterococcus faecium Pediococcus Streptococcus Lactobacillus •A maioria dos produtos comerciais incluem Pediococcus e, ou Streptococcus, os quais têm sua atividade em pH entre 6,5 e 5,0, •Estirpes de Lactobacilos homofermentativos que são mais efetivos na produção de ácido lático em pH mais ácido. MECANISMO DE AÇÃO Na silagem a acidificação se inicia pela produção de ácido láctico pela bactérias homofermentativas. Nos 4 primeiros dias os lactobacilos homofermentativos são dominantes (Lactobacilus plantarum), Posteriormente lugar as bactérias heterofermenativas (Lactobacilus brevis e Lactobacillus buchneri) No final do processo verifica-se que mais de 75% dos lactobacilos são heterofermentativos, em função da tolerância 3 vezes maior ao acefato do que as homofermentativas. Microorganismos na silagem • Os efeitos dos inoculantes sobre a qualidade das silagens, na prática são basicamente em relação às perdas de MS • Para volumosos, o rápido abaixamento do pH, devido ao inoculante, pode reduzir a quebra enzimática da hemicelulose, enquanto que o pH baixo pode aumentar a hidrólise ácida da hemicelulose, levando ao equilíbrio. EFEITOS DOS INOCULANTES Efeitos do uso de inoculantes na fermentação de silagens. Sem inoculantes Com inoculantes Baixa concentração de lactobacilos Acidificação lenta Maiores perdas de energia e MS pH final suficiente, perde + nutrientes Odor desagradável Baixa palatabilidade Menor valor nutritivo Alta concentração de lactobacilos Acidificação rápida Menores perdas de energia e MS pH final adequado, preserva +nutrientes Odor agradável Boa palatabilidade Bom valor nutritivo