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Controle analítico de mostos, vinhos e derivados da uva e do vinho Disciplina de Enologia III Profa. Gisele 28/04/2011 14:08 2 Introdução Controle analítico de mosto, vinhos e derivados: • Essencial para produtos de boa qualidade (controle de qualidade enológico: parâmetros estabelecidos por lei); • Andamento do processo: identificar possíveis alterações e intervir realizando as devidas correções; • protocolo a ser seguido; Principais razões para analisar: - controle de qualidade, maturação, processamento e envelhecimento, assemblage; - desde a determinação da colheita, momento adequado para envase e no amadurecimento; 28/04/2011 14:08 3 28/04/2011 14:08 4 Análises físico-químicas em Mostos Parâmetro Método Açúcares Refratométrico / Químico/ Enzimático pH Potenciométrico Acidez Total Volumétrico ácido-base ou potenciométrico Ácido málico HPLC (cromatografia líquida de alta eficiência)/ Enzimático Ácido tartárico HPLC / Químico Acidez Volátil Destilação por arrastamento de vapor + Volumetria ácido base Antocianas Químico (Descoloração pelo SO2 / Variação de cor em função do pH) IPT Espectrofotométrico (DO280) Intensidade Corante Espectrofotométrico (DO420+DO520+DO620) 28/04/2011 14:08 5 Análises físico-químicas em vinhos (novos) Objetivo Parâmetro Conclusão da ferm. alcoólica: Densidade Açúcares redutores Teor alcoólico Estado de conservação: Acidez Volátil Composição em ácidos: pH Acidez Total F. Malolática (Ác. Málico/Ác. Láctico) 28/04/2011 14:08 6 Análises físico-químicas em vinhos Parâmetro Método Teor Alcoólico Destilação + Areometria ou Balança Hidrostática ou Densimetria digital Densidade Areometria / Balança Hidrostática / Densimetria digital Açúcares redutores Químico Acidez volátil Destilação por arrastamento de vapor + Volumetria ácido-base pH Potenciometria Acidez Total Volumetria ácido-base FML HPLC / Enzimático / Cromat. em papel 28/04/2011 14:08 7 Destilados: Graspa, Brandy... Descrição Método Procedimento / Equipamento ACIDEZ FIXA (Destilados) Indireto Cálculo ACIDEZ TOTAL (Destilados) Alcalinimetria Manual ACIDEZ VOLÁTIL (Destilados) Alcalinimetria Manual ÁLCOOIS SUPERIORES Colorimetria Espectrofotômetro ÁLCOOL (Destilação) Densimetria Destilador - Densímetro ALDEÍDOS Iodometria Manual ÉSTERES Alcalinimetria Refluxo METANOL Colorimetria Espectrofotômetro 28/04/2011 14:08 8 Acidez Total - Importância: sabor e, indiretamente, pelos seus efeitos sobre o pH, cor, estabilidade e vida média. - representa a acidez determinada por neutralização das funções ácidas, com ajuda de uma solução de sódio com normalidade conhecida; - reagente colorido, como azul de bromotimol que vira a pH 7,0, ou fenolftaleína que vira a pH 8,2; 28/04/2011 14:08 9 • Portaria nº 76 do Ministério da Agricultura (BRASIL, 2008); • 10 mL da amostra para o Erlenmeyer contendo 100 mL de água destilada, livre de dióxido de Carbono; • Titula-se com solução de hidróxido de sódio 0,1 N até obter a coloração rosa, usando-se 2- 3 gotas de fenolftaleína como indicador, ou em pHmetro até pH 8,2; • expressa em g/L ou meq /L de ácido tartárico. 28/04/2011 14:08 10 pH • Método potenciométrico, no qual se mede a diferença de potencial entre dois eletrodos mergulhados no líquido estudado; • O pH do vinho está relacionado com a resistência às enfermidades, com a coloração, sabor, porcentagem total de dióxido de enxofre no estado livre, entre outros. 28/04/2011 14:08 11 • Calibração do pHmetro (seguindo as instruções do fabricante) -Solução tampão pH 4,0 -Solução tampão pH 7,0 • Portaria nº 76 do Ministério da Agricultura (BRASIL, 2008) - mergulha-se o eletrodo na amostra, cuja temperatura deve estar compreendida entre 20 e 25 °C e tão próxima quanto possível dos 20 °C; - leitura na escala de valor de pH. 28/04/2011 14:08 12 Teor Alcoólico • Importância: classificação dos produtos; • Método densimétrico; • Baseia na separação do álcool por destilação da amostra e sua posterior quantificação de acordo com a densidade relativa do destilado a 20 ºC. 28/04/2011 14:08 13 • Portaria nº 76 do Ministério da Agricultura (BRASIL, 2008); • para a obtenção do destilado mede-se 200 mL da amostra em um balão volumétrico, anotando sua temperatura inicial e, transfere-se a amostra para o balão de destilação; • Conecta-se ao condensador; • Recolhe-se cerca de três quartos do volume total; • Completa-se o volume, à mesma temperatura inicial, com água destilada, e agita-se; • Após a destilação, determina-se a densidade do destilado a 20ºC; • Resultado expresso em % de volume, a 20 ºC, correspondente ao número de litros de álcool etílico contido em 100 litros de vinho. 28/04/2011 14:08 14 Anidrido Sulfuroso Livre (Método Ripper, Iodometria) • Corresponde ao anidrido sulfuroso encontrado no estado de SO₂ (forma ativa) e de combinações minerais; • Princípio de ação: destruição de proteínas enzimáticas; • 25 mL de vinho em erlenmayer, 2,5 mL de ácido sulfúrico 1:3 e 2 mL de amido 1% como indicador; • Titular com solução de iodo 0,02N até coloração azul persistente; • Quantidade expressa em mg/L=(mL gasto.N.32.1000)/25 28/04/2011 14:08 15 Anidrido Sulfuroso Total (Método Ripper, Iodometria) • Anidrido Sulfuroso Livre + Anidrido sulfuroso combinado; • É menos ativo que o SO₂ livre (mas é mais abundante = importante); • 25 mL de vinho em erlenmayer, 12,5 mL de hidróxido de sódio 1N, tampar e repouso de 15 minutos; • Adicionar 5 mL de ácido sulfúrico 1:3 e 1 mL de amido 1%; • Titular com solução de iodo 0,02N até coloração azul persistente; • Quantidade expressa em mg/L=(mL gasto.N.32.1000)/25 28/04/2011 14:08 16 Acidez Volátil (Método Cazenave-Ferré) • Representa o conteúdo do vinho em ácido acético; • Controle de alterações: bactérias acéticas; • 10mL de vinho e 1mL de óxido de mercúrio no bulbo de aparelho; • Recolher 100mL de destilado e titular com hidróxido de sódio 0,1N até com rosada, em presença de fenolftaleína; 28/04/2011 14:08 17 • AV (mEq/L) = (mL gasto.0,1.1000)/10 • AV (g/L) = (mL gasto.0,1.1000.0,06)/10 28/04/2011 14:08 18 Outras análises importantes • Açúcares redutores; • Ácido málico; • Acetaldeído; • Ácido Sórbico e Benzóico; • Testes de identificação de precipitado; 28/04/2011 14:08 19 • Instrução Normativa número 02 do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento • Metodologia analítica para determinação da razão isotópica do oxigênio em vinhos (Espectrometria de massa) • Método desenvolvido pelo Laren, identifica a adição de água exógena (estranha) ao produto. • Detecta fraudes!